| Comunicación Nº: 050 | English version  |
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S. Ortiz, S. Frede, E. Hliba
[Título] [Introducción] [Resultados] [Iconografía] [Discusión] [Bibliografía]
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Los tejidos estudiados fueron: endometrio normal, Pólipo endometrial,, Hiperplasia glándulo quística, Hiperplasia endometrial con Atipia, y endometrio con Carcinoma bien diferenciado.
Todos los tejidos fueron fijados en Formol al 10% e incluídos en parafina. Todas las secciones histológicas fueron teñidas con hematoxilina /eosina para su evaluación histopatológica.
Secciones de 5 micras de espesor, fueron montadas con poly-L lisina,desparafinadas con xilol y posteriormente rehidratadas.
Se bloqueó la actividad de la peroxidasa endógena, incubando los tejidos por 5 minutos, con H2O2 al 3% (Sigma Chemical Co .,St Louis, MO) . Los tejidos fueron lavados con fosfato buffer salino (PBS) .Posteriormente se realizó la digestión enzimática con Trypsina (Sigma) por 15 min. a 37º C.
Las secciones fueron incubadas con la Lectina Arachis Hipogea (PNA) (Sigma) a una concentración de 40 ug/ml y para Agaricus Bisporus (ABL) la concentración utilizada fue de 0,72. 2,8 um/ml. Ambas lectinas fueron incubadas durante 45 minutos a 37ºC
El revelado se realizó con Diaminobencidina (DAB), deteniéndose la reacción con agua bidestilada. La coloración de contraste se realizó Hematoxilina .
Como controles específicos se incubaron secciones con solución de Galactosa al 0,2M para PNA y con Mucina de estómago de cerdo (Sigma Chemical Co.,St Louis MO) para ABL.
La lectina ABL, fue purificada a partir de un hongo Champignone de Villa Allende (Córdoba) por el Dr Irazoqui, Dto de Bioquímica Clínica, Fac. de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Córdoba.
La reactividad fue evaluada en diferentes estructuras: Borde luminal y basal ,citoplasma, secreción de las células epiteliales y el componente estromal. La marcación fue evaluada en cruces: +- <25%.+ 25%-50%,++50-75% y +++> 75% de los elementos marcados.
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