El estudio de la ploidía de ADN en tumores sólidos revela
que las células tumorales a menudo poseen cantidades anormales
de ADN (aneuploidías de ADN) en comparación con las células
normales. En función del estatus de ploidía los tumores pueden
ser clasificados como tumores con contenido diploide o aneuploide
de ADN. Como se ha mencionado con anterioridad, las medidas del
contenido en ADN deben ser referidas a células referencia con
contenido normal en ADN y las diferencias entre ambas deben ser
expresadas en términos del INDICE DE ADN. El estudio de la
ploidía de ADN ha mostrado tener significado pronóstico
independiente en diferentes tipos de cáncer.
Como ejemplos más representativos del material estudiado en
nuestro Servicio Común de Citometría, referimos:
a) 91 pacientes con carcinoma laringo-faríngeo, 43 tratados
sólo con cirugía y 48 con cirugía y radioterapia a partir de
muestras en fresco. Resultados: 60% aneuploides, 74% en faringe y
46% en laringe. Los tumores aneuploides mostraron un peor
comportamiento en todos los pacientes independientemente de haber
sido tratados con radioterapia.
b) 88 pacientes con carcinoma colorrectal operados con intención
curativa y no tratados con radio o quimioterapia. Resultados:
47.7% diploides y 52.3% aneuploides. La fase S media fue 14.6%
para diploides y 16.9% para aneuploides. El 26% de los tumores
diploides recurrieron en los 12 meses posteriores a la
intervención frente a un 36.9% en aneuploides.
Para la cuantificación de la actividad
proliferativa mediante Citometría de Flujo procedemos a calcular
mediante modelos matemáticos el porcentaje de células en fase
S. El estudio de %fase S y ploidía de ADN en distintos tumores
como linfomas no Hodgkin, neuroblastoma y cánceres de mama,
ovario, colon, pulmón y vegiga han mostrado poseer significado
pronóstico. A menudo las células tumorales poseen una fase S
aumentada en comparación con las células normales del mismo
tejido. Siguiendo las recomendaciones de la Conferencia de
Consenso para el ADN (Cytometry 14:471, 1993) es necesario
establecer puntos de corte para el porcentaje de células en fase
S separadamente para tumores diploides y aneuploides. En nuestra
experiencia hemos encontrado que:
a) En el carcinoma laringo-faríngeo, la fase S es muy superior
en tumores aneuploides respecto a los diploides, en ganglios
linfáticos positivos respecto a negativos y en estados avanzados
respecto a estados tempranos de la enfermedad. Así mismo, la
fase S fue mayor en tumores poco diferenciados y se encontró ser
un buen estimador de recurrencia y metástasis.
b) En el caso del carcinoma colorrectal, se encontró tanto en
tumores diploides como aneuploides una mayor recurrencia en
aquellos con fase S por encima del punto de corte frente a los de
fase S por debajo del mismo.
c) En el carcinoma epidermoide de pulmón la influencia de la
fase S del ciclo celular fue estudiada mediante análisis
multivariante mostrando que por cada aumento en una unidad de la
proporción de células en fase S se incrementa el riesgo de
morir en 1.026 (IC 1.011-1.042, p<0.001).
Pero, ¿cuál es el valor real
del estatus de ploidía así como de la actividad proliferativa
analizado por Citometría de flujo? Con el fin de utilizar estos
datos como información complementaria de valor predictivo en el
manejo terapeútico de estos pacientes, definimos un Perfil
Cinético de Comportamiento combinando estos dos parámetros
citométricos. Este puede ser:
* Perfil cinético favorable: tumores diploides con baja fase S =
Bajo riesgo de recurrencia
* Perfil cinético desfavorable: tumores diploides con alta fase
S y todos los aneuploides = Alto riesgo de recurrencia.
Este parámetro ha demostrado poseer significado pronóstico en
nuestros casos estudiados de carcinoma de colon y
laringo-faríngeo.
Por otra parte, si asociamos los parámetros
clínico-patológicos y el perfil cinético podemos formular
índices pronósticos que pueden ser aplicados para clasificar
pacientes con alto riesgo de recidivas y metástasis de manera
individualizada. Hemos encontrado capacidad discriminatoria para
el comportamiento biológico en el carcinoma colorrectal y en el
carcinoma epidermoide de pulmón. La formulación para
colorrectal es la siguiente:
IP = (0.1214 x %S) + (1.140 x Estadio 2) + (1.827 x Estadio 3)
En la siguiente gráfica se muestra el distinto comportamiento
para tumores colorrectales según este índice pronóstico en
relación al tiempo de recurrencia expresado en meses.
El objetivo final ha sido encontrar parámetros de seguimiento reproducibles, objetivos y complementarios a los clínico-patológicos que nos permita estimar en cada caso la agresividad potencial de la neoplasia y su correspondiente monitorización terapeútica.