Log del 14 de Mayo de 2002

Session Start: Tue May 14 17:40:01 2002

[18:11] *** MSCrespo (mjcoma@inves10.hgy.es) has joined #curso

[18:11] (MSCrespo> Buenas tardes

[18:11] (vitE> hola

[18:11] (MSCrespo> vamos a hablar de la inflamación

[18:12] (MSCrespo> han visto que tienen documentación en la pagina web ?

[18:12] (vitE> si

[18:12] (MSCrespo> vamos a comentar hoy, mientras leen los 3 primeros puntos del temario

[18:12] (MSCrespo> y mañana veremos el resto

[18:13] (MSCrespo> pueden preguntar cuanto quieran....

[18:13] (MSCrespo> vamos a hacer un breve repaso del texto

[18:13] (MSCrespo> pueden leerlo tambien en sus apuntes

[18:14] (MSCrespo> 1. LA REACCION INFLAMATORIA: GENERALIDADES

[18:14] (MSCrespo> La reacción inflamatoria

[18:14] (MSCrespo> Es la respuesta del organismo al daño producido por agentes físicos, químicos o biológicos.

[18:14] (MSCrespo> Es generalmente beneficiosa, puesto que su evolución habitual es a la destrucción del agente nocivo y del tejido dañado, y a la reparación del daño.

[18:14] (MSCrespo> Se realiza a través de mecanismos celulares y moleculares redundantes. La importancia de la reacción inflamatoria en Patología se justifica porque en casi dos tercios de la totalidad de las enfermedades intervienen los mecanismos patogénicos propios de la respuesta inflamatoria.

[18:14] (MSCrespo> Elementos que intervienen en la reacción inflamatoria

[18:14] (MSCrespo> i) El plasma sanguíneo aporta los anticuerpos y las proteínas de los sistemas de activación: coagulación, complemento, cininas y fibrinolítico.

[18:14] (MSCrespo> ii) El endotelio vascular aporta moléculas que regulan la reactividad vascular y el intercambio de plasma y elementos celulares de la sangre. Asimismo es capaz de expresar en su superficie las moléculas de adhesión responsables de los patrones de reclutamiento de los elementos celulares al intersticio celular.

[18:14] (MSCrespo> iii) Las células sanguíneas.

[18:15] (MSCrespo> iv) Las células del tejido conectivo: fibrobastos, mastocitos y macrófagos.

[18:15] (MSCrespo> Los sistemas de activación en la reacción inflamatoria

[18:15] (MSCrespo> Los sistemas de activación son un conjunto de proteínas,

[18:15] (MSCrespo> coordinadas en sus funciones, que se encuentran en el plasma y funcionan de acuerdo con unas propiedades funcionales comunes: secuencia de activación definida, activación rápida y amplificación.

[18:15] (MSCrespo> Por su importancia en la reacción inflamatoria deben mencionarse:

[18:15] (MSCrespo> i) El sistema de la coagulación se encarga de bloquear los vasos eferentes del foco inflamatorio para evitar ls difusión del agente nocivo.

[18:15] (MSCrespo> ii) El sistema fibrinolítico se encarga de repermeabilizar los vasos, una vez pasado el episodio inflamatorio.

[18:15] (MSCrespo> iii) El sistema de las cininas se encarga de aumentar la luz vascular para aumentar el aporte sanguíneo y de contraer el músculo liso para evitar la difusión del agente pro-inflamatorio.

[18:15] (MSCrespo> iv) El sistema del complemento se encarga de destruir agentes patógenos y células infectadas.

[18:16] (MSCrespo> 2. EL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

[18:16] (MSCrespo> El complemento constituye un componente integral de la defensa frente a la infección y de la respuesta inflamatoria.

[18:16] (MSCrespo> Las actividades generadas para su utilización en ambos procesos, se derivan de proteínas precursoras y de la fusión de múltiples proteinas en una organización supramolecular.

[18:16] (MSCrespo> Estas proteínas son en muchos casos serina-proteasas que se activan por proteolisis de forma secuencial.

[18:16] (MSCrespo> El sistema se compone de unas treinta proteínas plasmáticas. Además, existen existen varios receptores de membrana expresados en las superficies externas de las células del sistema inmuno-inflamatorio encargadas de ligar de forma selectiva los productos generados durante la activación del sistema del complemento.

[18:16] (MSCrespo> El sistema se completa con una serie de proteínas reguladoras que protegen a las células del ataque por activación accidental del sistema del complemento. El papel del sistema del complemento en la defensa frente a la infección se ha hecho evidente a partir de distintas fuentes de información:

[18:16] (MSCrespo> i) La existencia de infecciones recurrentes y severas en los individuos con deficiencias genéticas de proteínas del complemento.

[18:16] (MSCrespo> ii) La demostración de que el daño tisular es dependiente de la activación del sistema del complemento en modelos experimentales de daño tisular por mecanismo inmune.

[18:16] (MSCrespo> iii) Los estudios funcionales en animales con destrucción selectiva de genes que codifican receptores para proteínas del complemento mediante técnicas de biología molecular.

[18:16] (MSCrespo> El sistema del complemento está organizado en dos vías de activación que conducen a una vía común de ataque a la membrana:

[18:16] (MSCrespo> La llamada vía clásica se activa por complejos antígeno-anticuerpo. La vía alternativa se activa cuando un componente activado del complemento (C3b) se une a la superficie de un patógeno, donde escapa a la acción de las moléculas reguladoras.

[18:17] (MSCrespo> La vía clásica de activación del complemento

[18:17] (MSCrespo> La vía clásica se pone en marcha cuando una molécula de C1 se une a un complejo antígeno anticuerpo.

[18:17] (MSCrespo> El C1 es un complejo de una subunidad de C1q, dos subunidades de C1r y dos subunidades de C1s.

[18:17] (MSCrespo> El C1q tiene seis sitios de unión para la porción Fc de la molécula de anticuerpo. La afinidad de una subunidad aislada de C1q para cada porción Fc es baja, de tal manera que se requieren al menos dos sitios para la unión estable de C1q y la consiguiente activación de C1r.

[18:17] (MSCrespo> Por esta razón se requiren dos moléculas de IgG yuxtapuestas o una molécula de IgM modificada, de tal manera que la IgG y la IgM libres no activan el complemento.

[18:17] (MSCrespo> El C1r activado hidroliza al C1s para generar la proteasas activa C1s, que a su vez hidroliza C4 para formar C4a y C4b, y después que el C2 se ha unido al C4b, se genera C4bC2a: la C3-convertasa de la vía clásica.

[18:17] (MSCrespo> La vía alternativa de activación del complemento

[18:18] (MSCrespo> La vía alternativa depende de la generación de C3 activado. Posteriormente, el ataque espontáneo por el agua del enlace ester-tiol del C3 en solución, genera una forma activa: C3(H2O), que es equivalente al C3b.

[18:18] (MSCrespo> Este proceso ocurre de manera constitutiva a un ritmo lento (C3 tickover).

[18:18] (MSCrespo> El C3b puede ser también proporcionado por la vía clásica, de tal manera que la vía alternativa es un mecanismo positivo de autoregulación, incluso cuando existe una activación prototípica de la vía clásica por complejos inmunes.

[18:18] (MSCrespo> El enlace éster-tiol activado normalmente decae en solución, sin embargo, cuando se une a una superficie celular o a los complejos inmunes recluta secuencialmente a los factores B y D para generar la convertasa de la vía alternativa: C3bBb.

[18:18] (MSCrespo> Este complejo es de corta duración pero puede estabilizarse en algunas superficies microbianas mediante la unión de otra proteína sérica: la properdina.

[18:18] (MSCrespo> Los efectos biológicos de la activación del complemento

[18:18] (MSCrespo> i) Opsonización. El C3b y, en menor grado, el C4b son opsoninas, es decir, revisten a las partículas extrañas para que puedan ser fagocitadas mediante la unión a receptores específicos del complemento.

[18:18] (MSCrespo> ii) Inflamación. Las anafilatoxinas C5a, y en menor medida, C4a y C3a son verdaderos mediadores inflamatorios que producen aumento de la permeabilidad vascular, reclutamiento y activación de fagocitos.

[18:19] (MSCrespo> iii) Lisis. El C5b une y recluta C6 y C7 a la superficie blanco. C7 y, subsiguientemente, C8 cambian su conformación para exponer los dominios hidrofóbicos e insertarlos en la bicapa lipídica.

[18:19] (MSCrespo> El complejo C5b678 cataliza la polimerización del componente final C9, el cual forma un poro transmembrana de, aproximadamente, 10 nm de diámetro y produce la lisis de la célula.

[18:19] (MSCrespo> Este complejo macromolecular se conoce con el nombre de complejo de ataque a la membrana (membrane attack complex, MAC).

[18:19] (MSCrespo> iv) Aclaramiento de complejos inmunes. El complemento tiene un importante papel en la solubilización y la remoción de la circulación de los complejos inmunes.

[18:19] (MSCrespo> Esta función se efectúa por la interacción de las moléculas de C4b y C3b unidas covalentemente al complejo inmune con los receptores de complemento expresados en los hematíes, denominados CR1.

[18:19] (MSCrespo> Esta interacción permite transportar los complejos al hígado y al bazo para que sean eliminados por fagocitosis por las células del sistema mononuclear fagocitario presentes en esos órganos.

[18:19] (MSCrespo> Regulación de la activación del complemento

[18:20] (MSCrespo> Existen tres niveles principales de regulación del sistema del complemento

[18:20] (MSCrespo> i) C1. El inhibidor de C1 (C1 INH) actúa de dos maneras.

[18:20] (MSCrespo> En primer lugar se une al C1 libre en el suero e impide su activación espontánea. Se libera al producirse la activación por los complejos inmunes. También limita la activación de C4 y C2 al inhibir las proteasas C1r y C1s.

[18:20] (MSCrespo> ii) C3 convertasas. La vida media de las convertasas de C3 se limita por dos mecanismos. La vida media de los complejos se reduce por los denominados factores acceleradores del decaimiento (decay accelerating factors)

[18:20] (MSCrespo> .Algunos de estos factores se encuentran en las superficies de las células, por ejemplo el DAF y el CR1, que actúan sobre las convertasas de la vía clásica y de la vía alternativa.

[18:20] (MSCrespo> Otros son proteínas del suero, como C4-binding protein (C4bp) y factor H, que actúan respectivamente sobre C4b2b y C3bBb.

[18:20] (MSCrespo> Estas moléculas promueven la disociación de las C3 convertasas mediante unión al componente unido covalentemente (C4b o C3b) y desplazando al cofactor asociado.

[18:20] (MSCrespo> iii) C9. La unión de C9 a C5b678 se inhibe por dos proteínas de superficie CD59 y HRF (homologous restriction factor).

[18:21] (MSCrespo> Receptores del complemento

[18:21] (MSCrespo> El denominado receptor de complemento 1 (CR1) une C3b y C4b.

[18:21] (MSCrespo> El CR1 se encuentra en los hematíes, donde, como se ha mencionado, juega un papel fundamental en la remoción de los complejos inmunes de la circulación. También se encuentra en los macrófagos y neutrófilos donde coopera en la inducción de la fagocitosis.

[18:21] (MSCrespo> El denominado receptor de complemento 2 (CR2) une iC3b, y se encuentra en las células B, donde juega un papel en el cambio de la clase de anticuerpos sintetizados y en la memoria inmune. CR3 y CR4 son receptores relacionados que unen iC3b (C3b hidrolizado en su cadena (por la acción de los factores H y I) y se encuentran en monocitos/macrófagos y neutrófilos.

[18:21] (MSCrespo> Desencadenan la fagocitosis de partículas opsonizadas en cooperación con los receptores para la porción Fc o, incluso, de forma independiente.

[18:21] (MSCrespo> La fagocitosis de microorganismos vía CR3, y vía CR1 en combinación con Fc(R, es el principal mecanismo de defensa contra las infecciones fúngicas y bacterianas.

[18:21] (MSCrespo> Deficiencias de factores del complemento

[18:21] (MSCrespo> Se han descrito deficiencias de prácticamente todos los componentes del sistema del complemento en el humano.

[18:21] (MSCrespo> Las deficiencias de los componentes C1, C2 y C4 bloquean la activación por la vía clásica y se asocian con enfermedades por depósito tisular de inmunocomplejos. La deficiencia del inhibidor de C1 se manifiesta por la aparición de episodios de edema angioneurótico.

[18:22] (MSCrespo> El déficit de C3 se asocia con episodios recurrentes de infecciones bacterianas.

[18:22] (MSCrespo> Las deficiencias de C5, C6, C7, C8, properdina y factor D se asocian con incremento de las infecciones por gérmenes del género Neisseria. Mutaciones en el factor H se han asociado recientemente con formas atípicas o no diarreicas del síndrome hemolítico urémico y con glomerulonefritis membranoproliferativas de tipo II.

[18:22] (MSCrespo> El mecanismo patogénico subyacente en esas deficiencias sería la activación no controlada del sistema del complemento sobre el endotelio o en la membrana basal glomerular tras un daño inicial que sería autolimitado en ausencia de esa mutación.

[18:22] (MSCrespo> . LOS MECANISMOS DE SEÑALIZACION BIOQUÍMICA EN LA REACCIÓN INFLAMATORIA

[18:22] (MSCrespo> Análisis molecular de la reacción inflamatoria

[18:22] (MSCrespo> El estudio molecular de la reacción inflamatoria requiere estudiar:

[18:22] (MSCrespo> i) Los mecanismos de la transducción de señales y la comunicación intercelular: movimientos de iones, activación de kinasas y activación de la expresión génica.

[18:22] (MSCrespo> ii) Las enzimas de los sistemas de activación, de la señalización intracelular y de la producción de mediadores químicos

[18:22] (MSCrespo> iii) Las interacciones moleculares entre citocinas, mediadores y mensajeros lipídicos, y moléculas de adhesión.

[18:23] (MSCrespo> Transducción de señales

[18:23] (MSCrespo> Conjunto de mecanismos moleculares que permiten el paso de una información desde el exterior al interior de la célula. Aunque el concepto se aplica el conjunto de la biología celular, en la respuesta inmuno-inflamatoria tiene especial relevancia puesto que la reacción defensiva depende de una adecuada detección y respuesta celular a los agentes proinflamatorios.

[18:23] (MSCrespo> Existen dos tipos de comunicación celular principales en el sistema inmunitario:

[18:23] (MSCrespo> i) Mediante interacción de moléculas solubles con receptores. Ejemplos: interleucinas/receptores de interleucinas, agentes quimiotácticos/receptores de 7 dominios transmembrana.

[18:23] (MSCrespo> ii) Mediante interacción de dos receptores de superficie. Ejemplos: TCR (receptor de células T)-CMH (complejo mayor de histocompatibilidad)/péptido antigénico, interacción leucocito/célula endotelial a través de moléculas de adhesión vascular.

[18:23] (MSCrespo> La señalización celular pone en marcha dos vías de respuesta:

[18:23] (MSCrespo> i) Precoz o citoplásmica, por ejemplo, la degranulación de los mastocitos y la contracción del músculo liso bronquial en una reacción anafiláctica.

[18:23] (MSCrespo> ii) Tardía o nuclear, dependiente de la expresión génica y de cambios fenotípicos, por ejemplo, la síntesis de citocinas, proliferación celular o apoptosis.

[18:24] (MSCrespo> Receptores principales en el sistema inmunitario implicados en la reacción inflamatoria

[18:24] (MSCrespo> Receptores acoplados a proteínas G heterotriméricas:

[18:24] (MSCrespo> Su estudio detallado tiene un interés especial, puesto que la quimiotaxis se realiza en su conjunto a través de quimiotrayentes que actúan sobre receptores acoplados a proteínas G.

[18:24] (MSCrespo> Se distinguen proteínas G de alto peso molecular, heterotriméricas compuestas de tres sub-unidades: a, b y g. Existen también proteínas G de bajo peso molecular agrupadas en varias familias: Ras, Rho, …

[18:24] (MSCrespo> Todas las proteínas G poseen dos funciones ligadas al metabolismo del GTP, lo que explica que se conozcan como proteínas G: capacidad para unir GTP, y capacidad de hidrolizarlo a GDP. La ocupación de los receptores acoplados a proteínas cambia el nucleótido unido a la subunidad a de la proteína G de tal manera que intercambia GDP por GTP y se produce la disociación de esta unidad de las subunidades bg.

[18:24] (MSCrespo>

[18:24] (MSCrespo> Receptores ligados a actividad kinasa:

[18:24] (MSCrespo> Receptores con actividad proteína tirosina kinasa (PTK), serina/treonina kinasa, o con especificidad kinasa dual .

[18:24] (MSCrespo> Se dividen en dos grandes tipos:

[18:24] (MSCrespo> i) Receptores con actividad catalítica intrínseca en la porción intracitoplásmica.

[18:25] (MSCrespo> Ejemplo: Factores de crecimiento hematopoyéticos.

[18:25] (MSCrespo> ii) Receptores que acoplan kinasas intracitoplásmica de manera no permanente utilizando para ello dominios adaptatorios.

[18:25] (MSCrespo> Ejemplo: Receptores para la porción Fc de la molécula de inmunoglobulina.

[18:25] (MSCrespo> Receptores ligados a actividad fosfatasa: En este caso también existen actividades fosfatasa intrínseca, como en el caso de la molécula CD45, o reclutamiento de actividad fosfatasa citoplásmica como en algunos tipos de receptores FcgR.

[18:25] (MSCrespo> Dominios adaptatorios en los receptores de membrana:

[18:25] (MSCrespo> Son dominios localizados en la porción intracelular de los receptores de membrana, que permiten el anclaje de moléculas citoplasmática implicadas en la transducción de la señal producida por la ocupación de los receptores. Se distinguen tres tipos fundamentales de dominios adaptadores.

[18:25] (MSCrespo> i) Dominios SH2 (sarcoma homology 2). Se componen de una porción de alrededor de 100 aminoácidos en los que se encuentran tirosinas fosforilables, que a su vez reclutan las tirosinas fosforiladas de otras proteínas citosólicas. Los dominios P-YXXM, interaccionan con el dominio SH2 de la fosfatidilinositol 3-kinasa. Los dominios que contienen P-YXXL, interaccionan con el dominio SH2 de los miembros de la familia scr.

[18:25] (MSCrespo> ii) Dominios SH3, contienen alrededor de 50 aminoácidos y reclutan secuencias ricas en prolinas.

[18:25] (MSCrespo> iii) Dominios de homología de pleckstrina (Pleckstrin Homology domain, PH). Interaccionan con inositol 3-fosfato y con las subunidades bg de las proteínas G heterotriméricas.

[18:26] (MSCrespo> Segundos mensajeros: Los segundos mensajeros mejor caracterizados por su intervención en la mediación de las respuestas inducidas por agonistas son:

[18:26] (MSCrespo> i) El acido adenílico cíclico (AMP cíclico), producido por la activación de adenilato ciclasas.

[18:26] (MSCrespo> ii) El ácido guanílico cíclico (GMPcíclico), producido por guanilato ciclasas. Es uno de los efectores de la acción del óxido nítrico en el sistema vascular.

[18:26] (MSCrespo> iii) El diacilglicerol (DAG), producido por fosfolipasas C.

[18:26] (MSCrespo> iv) El inositol 1,4,5 trisfosfato (IP3), producido también por fosfolipasas C al actuar sobre fosfoinosítidos. Su acción fundamental es sobre la movilización de iones calcio de los depósitos intracelulares.

[18:26] (MSCrespo> v) Iones calcio.

[18:26] (MSCrespo> La cascada de las MAP kinasas

[18:26] (MSCrespo> La cascada de proteín-kinasas activadas por mitógenos (MAP kinasas) es un sistema de señalización intracelular ampliamente conservado en eucariotas que consiste en tres módulos paralelos de kinasas, compuestos a su vez de distintas kinasas que actúan en cascada y son las encargadas de transmitir al núcleo de células en estado quiescente la información necesaria para iniciar el proceso de división celular. La relación de esta cascada con la reacción inflamatoria se debe a que tanto las citocinas proinflamatorias TNF e IL-1, como fenómenos pro-inflamatorios como el choque térmico, la hiperosmolaridad o la radiación ultravioleta son potentes activadores de alguno de los módulos de esta cascada. Los módulos de la cascada de las MAP kinasas son el módulo ERK/MAP, el módulo SAPK (proteín-kinasas activadas por stress) y el módulo p38. El módulo ERK/MAP se activa cuando ligandos específicos ocupan receptores con actividad tirosina

[18:26] (MSCrespo> tras que los módulos SAPK y p38 se activan preferentemente por citocinas proinflamatorias y stress ambiental. Los elementos sucesivos de la cascada que componen los distintos módulos son serina/treonina quinasas (MAP kinasa kinasa kinasa) que fosforilan a los elementos del segundo nivel denominados MAP kinasa kinasa o MEK. Los elementos de este segundo nivel poseen actividad serina y tirosina kinasa sobre dominios específicos de las MAP kinasas propiamente dichas. Estas enzimas serán los efectores finales de los sustratos celulares responsables de los cambios fenotípicos o de la respuesta nuclear a los agonistas iniciales.

[18:27] (MSCrespo> Factores de transcripción

[18:27] (MSCrespo> Son proteínas con capacidad de unirse a secuencias específicas de los genes, que modifican el estado de la transcripción basal. En el sistema inmune son importantes factores de transcripción como ISRE, activado como consecuencia de la estimulación por citocinas cuyo sistema de señalización incluye el sistema JAK/STAT, y NF-kB que activa numerosos elementos efectores de la respuesta inflamatoria.

[18:27] (MSCrespo> . LOS MECANISMOS DE SEÑALIZACION BIOQUÍMICA EN LA REACCIÓN INFLAMATORIA

[18:27] (MSCrespo> Análisis molecular de la reacción inflamatoria

[18:27] (MSCrespo> El estudio molecular de la reacción inflamatoria requiere estudiar:

[18:27] (MSCrespo> i) Los mecanismos de la transducción de señales y la comunicación intercelular: movimientos de iones, activación de kinasas y activación de la expresión génica.

[18:27] (MSCrespo> ii) Las enzimas de los sistemas de activación, de la señalización intracelular y de la producción de mediadores químicos

[18:27] (MSCrespo> iii) Las interacciones moleculares entre citocinas, mediadores y mensajeros lipídicos, y moléculas de adhesión.

[18:28] (MSCrespo> Transducción de señales

[18:28] (MSCrespo> Conjunto de mecanismos moleculares que permiten el paso de una información desde el exterior al interior de la célula. Aunque el concepto se aplica el conjunto de la biología celular, en la respuesta inmuno-inflamatoria tiene especial relevancia puesto que la reacción defensiva depende de una adecuada detección y respuesta celular a los agentes proinflamatorios.

[18:28] (MSCrespo> Existen dos tipos de comunicación celular principales en el sistema inmunitario:

[18:28] (MSCrespo> i) Mediante interacción de moléculas solubles con receptores. Ejemplos: interleucinas/receptores de interleucinas, agentes quimiotácticos/receptores de 7 dominios transmembrana.

[18:28] (MSCrespo> ii) Mediante interacción de dos receptores de superficie. Ejemplos: TCR (receptor de células T)-CMH (complejo mayor de histocompatibilidad)/péptido antigénico, interacción leucocito/célula endotelial a través de moléculas de adhesión vascular.

[18:28] (MSCrespo> La señalización celular pone en marcha dos vías de respuesta:

[18:28] (MSCrespo> i) Precoz o citoplásmica, por ejemplo, la degranulación de los mastocitos y la contracción del músculo liso bronquial en una reacción anafiláctica.

[18:28] (MSCrespo> ii) Tardía o nuclear, dependiente de la expresión génica y de cambios fenotípicos, por ejemplo, la síntesis de citocinas, proliferación celular o apoptosis.

[18:29] (MSCrespo> Receptores principales en el sistema inmunitario implicados en la reacción inflamatoria

[18:29] (MSCrespo> Receptores acoplados a proteínas G heterotriméricas:

[18:29] (MSCrespo> Su estudio detallado tiene un interés especial, puesto que la quimiotaxis se realiza en su conjunto a través de quimiotrayentes que actúan sobre receptores acoplados a proteínas G.

[18:29] (MSCrespo> Se distinguen proteínas G de alto peso molecular, heterotriméricas compuestas de tres sub-unidades: a, b y g. Existen también proteínas G de bajo peso molecular agrupadas en varias familias: Ras, Rho, …

[18:29] (MSCrespo> Todas las proteínas G poseen dos funciones ligadas al metabolismo del GTP, lo que explica que se conozcan como proteínas G: capacidad para unir GTP, y capacidad de hidrolizarlo a GDP. La ocupación de los receptores acoplados a proteínas cambia el nucleótido unido a la subunidad a de la proteína G de tal manera que intercambia GDP por GTP y se produce la disociación de esta unidad de las subunidades bg.

[18:29] (MSCrespo>

[18:29] (MSCrespo> Receptores ligados a actividad kinasa:

[18:29] (MSCrespo> Receptores con actividad proteína tirosina kinasa (PTK), serina/treonina kinasa, o con especificidad kinasa dual .

[18:29] (MSCrespo> Se dividen en dos grandes tipos:

[18:29] (MSCrespo> i) Receptores con actividad catalítica intrínseca en la porción intracitoplásmica.

[18:30] (MSCrespo> Ejemplo: Factores de crecimiento hematopoyéticos.

[18:30] (MSCrespo> ii) Receptores que acoplan kinasas intracitoplásmica de manera no permanente utilizando para ello dominios adaptatorios.

[18:30] (MSCrespo> Ejemplo: Receptores para la porción Fc de la molécula de inmunoglobulina.

[18:30] (MSCrespo> Receptores ligados a actividad fosfatasa: En este caso también existen actividades fosfatasa intrínseca, como en el caso de la molécula CD45, o reclutamiento de actividad fosfatasa citoplásmica como en algunos tipos de receptores FcgR.

[18:30] (MSCrespo> Dominios adaptatorios en los receptores de membrana:

[18:30] (MSCrespo> Son dominios localizados en la porción intracelular de los receptores de membrana, que permiten el anclaje de moléculas citoplasmática implicadas en la transducción de la señal producida por la ocupación de los receptores. Se distinguen tres tipos fundamentales de dominios adaptadores.

[18:30] (MSCrespo> i) Dominios SH2 (sarcoma homology 2). Se componen de una porción de alrededor de 100 aminoácidos en los que se encuentran tirosinas fosforilables, que a su vez reclutan las tirosinas fosforiladas de otras proteínas citosólicas. Los dominios P-YXXM, interaccionan con el dominio SH2 de la fosfatidilinositol 3-kinasa. Los dominios que contienen P-YXXL, interaccionan con el dominio SH2 de los miembros de la familia scr.

[18:30] (MSCrespo> ii) Dominios SH3, contienen alrededor de 50 aminoácidos y reclutan secuencias ricas en prolinas.

[18:30] (MSCrespo> iii) Dominios de homología de pleckstrina (Pleckstrin Homology domain, PH). Interaccionan con inositol 3-fosfato y con las subunidades bg de las proteínas G heterotriméricas.

[18:31] (MSCrespo> Segundos mensajeros: Los segundos mensajeros mejor caracterizados por su intervención en la mediación de las respuestas inducidas por agonistas son:

[18:31] (MSCrespo> i) El acido adenílico cíclico (AMP cíclico), producido por la activación de adenilato ciclasas.

[18:31] (MSCrespo> ii) El ácido guanílico cíclico (GMPcíclico), producido por guanilato ciclasas. Es uno de los efectores de la acción del óxido nítrico en el sistema vascular.

[18:31] (MSCrespo> iii) El diacilglicerol (DAG), producido por fosfolipasas C.

[18:31] (MSCrespo> iv) El inositol 1,4,5 trisfosfato (IP3), producido también por fosfolipasas C al actuar sobre fosfoinosítidos. Su acción fundamental es sobre la movilización de iones calcio de los depósitos intracelulares.

[18:31] (MSCrespo> v) Iones calcio.

[18:31] (MSCrespo> La cascada de las MAP kinasas

[18:31] (MSCrespo> La cascada de proteín-kinasas activadas por mitógenos (MAP kinasas) es un sistema de señalización intracelular ampliamente conservado en eucariotas que consiste en tres módulos paralelos de kinasas, compuestos a su vez de distintas kinasas

[18:31] (MSCrespo> que actúan en cascada y son las encargadas de transmitir al núcleo de células en estado quiescente la información necesaria para iniciar el proceso de división celular.

[18:31] (MSCrespo> La relación de esta cascada con la reacción inflamatoria se debe a que tanto las citocinas proinflamatorias TNF e IL-1, como fenómenos pro-inflamatorios como el choque térmico, la hiperosmolaridad o la radiación ultravioleta son potentes activadores de alguno de los módulos de esta cascada.

[18:31] (MSCrespo> Los módulos de la cascada de las MAP kinasas son el módulo ERK/MAP, el módulo SAPK (proteín-kinasas activadas por stress) y el módulo p38.

[18:32] (MSCrespo> El módulo ERK/MAP se activa cuando ligandos específicos ocupan receptores con actividad tirosina kinasa o de la familia de siete dominios transmembrana,

[18:32] (MSCrespo> mientras que los módulos SAPK y p38 se activan preferentemente por citocinas proinflamatorias y stress ambiental.

[18:32] (MSCrespo> Los elementos sucesivos de la cascada que componen los distintos módulos son serina/treonina quinasas (MAP kinasa kinasa kinasa) que fosforilan a los elementos del segundo nivel denominados MAP kinasa kinasa o MEK.

[18:32] (MSCrespo> Los elementos de este segundo nivel poseen actividad serina y tirosina kinasa sobre dominios específicos de las MAP kinasas propiamente dichas. Estas enzimas serán los efectores finales de los sustratos celulares responsables de los cambios fenotípicos o de la respuesta nuclear a los agonistas iniciales.

[18:32] (MSCrespo> Factores de transcripción

[18:32] (MSCrespo> Son proteínas con capacidad de unirse a secuencias específicas de los genes, que modifican el estado de la transcripción basal.

[18:32] (MSCrespo> En el sistema inmune son importantes factores de transcripción como ISRE, activado como consecuencia de la estimulación por citocinas cuyo sistema de señalización incluye el sistema JAK/STAT, y NF-kB que activa numerosos elementos efectores de la respuesta inflamatoria.

[18:32] (MSCrespo> El factor de transcripción NF-kB (nuclear factor kB)

[18:33] (MSCrespo>

[18:33] (MSCrespo> Figura 1.5. Activación de NF-kB. NIK, NF-kB inducer kinase

[18:33] (MSCrespo> El factor de transcripción NF-kB fue descrito por primera vez en 1986 por Sen y Baltimore en el enhancer del promotor de la cadena ligera k de las inmunoglobulinas en los linfocitos B, lo que explica su denominación.

[18:33] (MSCrespo> En los años siguientes se encontraron secuencias de unión de este factor de transcripción en los promotores de numerosos genes relacionados con el sistema inmune como citocinas, (IL-2, IL-6, GM-CSF), moléculas de adhesión ICAM, VCAM, y enzimas inducibles de la respuesta inflamatoria (sintasa de óxido nítrico, ciclooxigenasasa-2). NF-?B, además de desempeñar un papel central en la inflamación y la respuesta inmune, interviene en la proliferación celular y en la apoptosis.

[18:33] (MSCrespo> Los sitios de unión a NF-kB sirven como elementos reguladores de la transcripción que responden, principalmente, a estímulos inmunológicos, como TNFa, IL-1, LPS y receptores para la porción Fc de la molécula de inmunoglobulinas, factores de crecimiento; y a estímulos como la radiación ultravioleta.

[18:33] (MSCrespo> En las células en reposo el NF-kB se encuentra inactivo en el citoplasma asociado con una proteína inhibitoria, IkB. La liberación de IkB permite la rápida activación de NF-kB y su translocación al núcleo. Así, ciertos genes regulados por NF-kB pueden ser activados transcripcionalmente en minutos.

[18:33] (MSCrespo> Hasta el momento se han clonado en mamíferos 5 miembros de la familia de proteínas NF-kB/Rel: c-Rel, NF-kB1 (p50/p105), NF-kB2 (p52/p100), Rel A (p65) y Rel B. Además se han clonado 2 proteínas en Drosophilla: Dorsal y Dif.

[18:33] (MSCrespo> En cuanto a la proteína inhibitoria se conocen: IkBa, IkBb, IkBg, IkBe, Bcl-3 y las formas precursoras NF-kB1 y NF-kB2. En Drosophilla se ha clonado una proteína homóloga, Cactus que regula la activación de Dorsal y Dif.

[18:34] (MSCrespo> En 1997 se caracterizaron algunas kinasas que intervienen en la ruta de activación de NF-kB.

[18:34] (MSCrespo> En la célula en reposo el miembro mejor caracterizado de la familia de inhibidores, IkB-a, se une al heterodímero p50/p65 en el citoplasma. Cuando las células se exponen a los inductores de NF-kB, tales como, TNF-a o IL-1b, dos serinas de IkB-a (Ser32 y Ser36) se fosforilan específicamente.

[18:34] (MSCrespo> Está fosforilación es una señal de ubicuitinación, la ubicuitina marca a la proteína para su posterior degradación por el proteasoma 26S. Entonces el NF-kB se libera, se transloca al núcleo y activa la transcripción de genes.

[18:34] (MSCrespo> Recientemente varios grupos han identificado y clonado 2 kinasas que fosforilan IkB-a: IKKb (Kinasa a de IkB) e IKKb, también se ha descrito una kinasa que fosforila a estas kinasas, NIK (NF-kB inducer kinase).

[18:34] (MSCrespo> La familia de factores nucleares de células T activadas (NFAT)

[18:34] (MSCrespo> Estos factores han recibido enorme atención en los últimos años puesto que son los blancos farmacológicos de drogas inmunosupresoras ampliamente usadas en clínica como la ciclosporina. Las proteínas de esta familia juegan un papel importante en la regulación de la expresión de genes de citocinas y de otras proteína implicadas en la respuesta inmune.

[18:34] (MSCrespo> Estos factores se encuentran preformados en el citoplasma en un estado fosforilado que impide su translocación al núcleo celular y su interacción con las secuencias específicas de los promotores.

[18:34] (MSCrespo> Sin embargo, cuando las células del sistema inmune se activan por distintos agonistas, se produce activación de fosfatasas dependientes de calcio y calmodulina, como la calcineurina, que provocan la defosforilación de los factores NFAT y permiten su traslocación al núcleo celular.

[18:34] (MSCrespo> Estas fosfatasas son inhibidas por ciclosporina y FK506. Las proteínas de la familia NFAT muestran ciertas analogías con las proteínas de la familia Rel/NF-kB, y en algunas casos actúan de forma coordinada con estas proteínas o con miembros de la familia AP-1

[18:34] (MSCrespo>

[18:35] (MSCrespo> Mediadores de la reacción inflamatoria

[18:35] (MSCrespo> Son moléculas liberadas en el foco inflamatorio que presentan las siguientes características:

[18:35] (MSCrespo> i) Actúan en un entorno local intermedio entre el de las hormonas y el de los neurotransmisores.

[18:35] (MSCrespo> ii) Intervienen en la comunicación celular al ser liberadas por células y actúan sobre otros tipos celulares a través de receptores específicos.

[18:35] (MSCrespo> iii) En su espectro de acciones biológicas destacan dos características: la pleiotropía y la redundancia.

[18:35] (MSCrespo> Sobre esta base, un mediador puede actuar sobre distintos blancos y ejercer sobre ellos diversos efectos (pleiotropía), por otra parte, distintos mediadores pueden ejercer el mismo efecto el mismo blanco celular (redundancia).

[18:36] (MSCrespo> Bueno, eso es todo por ahora,

[18:36] (MSCrespo> preguntas ?

[18:36] (vitE> no

[18:36] (MSCrespo> Me da la impresión de que no se ha entendido nada

[18:37] (vitE> es digerirlo ; )

[18:38] (MSCrespo> Si no es ahora, las preguntas se pueen hacer en otro momento en mi correo:

[18:38] (MSCrespo> O en el panel de dicusión.

[18:39] (MSCrespo> ¿podrías decirme si la reacción inflamatoria es buena o mala?

[18:39] (MSCrespo> Alguien sabe si hay una forma sistémica de la reacción inflamatoria

[18:40] (MSCrespo> Mañana se pueden hacer preguntas a partir de las 18,30

[18:40] (vitE> creo que si..

[18:42] (vitE> Es la hora de la siesta?

[18:43] (MJesus> eso parece-....

[18:43] (MJesus> a ver lurdes

[18:44] (MJesus> yolanda,

[18:44] (MJesus> preguntas ?

[18:44] (lourdes> es que ha sido todo muy rápido

[18:45] (MSCrespo> Habéis podido leer los apuntes?

[18:45] (vitE> la reaación inflam de por si es buena. ¿Correcto?

[18:45] (MSCrespo> Sí, solo cuando es excesiva o inapropiada no es beneficiosa

[18:48] (MSCrespo> El viernes pondremos un pequeño examen no demasiado complicado

[18:51] (MJesus> mas preguntas ?

[18:51] (pecarre> en pricipio no

[18:51] (yolanda> no

[18:51] (vitE> no

[18:52] (MSCrespo> bueno, entonces, ¿hasta mañana ?

[18:52] (lourdes> hasta mañana

[18:52] (pecarre> hasta mañana, adios y gracias

[18:53] (Angela> hasta mañana y gracias End of #curso buffer Tue May 14 19:33:35 2002

Programa del Curso

Avisos

Internet

Paneles de discusión