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Algunos de los resultados obtenidos se observan en la tabla 1. Destaca la gran capacidad de esta técnica para identificar cambios estructurales en ND incipientes (Fig. 1). En particular el porcentaje de fibrosis periglomerular y el área glomerular que diferencian de forma estadística (Newman-Keuls, p<0.05 y p<0.01, respectivamente) entre los pacientes con DMIDNA y DMIDA. En pacientes diabéticos se aprecia ensanchamiento del intersticio con valores estadísticamente significativos frente a los controles. También son precoces los cambios producidos en las estructuras glomerulares con ensanchamiento y expansión del área mesangial y flócular y secundariamente del área ocupada por el glomérulo (tabla 1).
En términos generales los resultados obtenidos para la colágena tipo IV son semejantes sólo que con menor significación estadística, así, el depósito de colágena porcentual y por área tanto en intersticio como en la zona vecina a los glomérulos es mayor en enfermos diabéticos (tabla 2), no obstante es menor la capacidad discriminatoria para cuantificar las estructuras glomerulares (tabla 2).
Existe un alto índice de correlación significativa entre todos los valores obtenidos con la tinción de rojo Sirio y la inmunotinción para la colágena IV.
Tabla 1. Evaluación por análisis de imagen - Tinción histoquímica de rojo Sirio.
Tinción Rojo Sirio | N |
% Fibrosis Total |
Área Fibrosis Total (µm²) |
% Fibrosis Intersticial |
Área Fibrosis Intersticial (µm²) |
% Fibrosis Periglomer. |
Área Fibrosis Periglomer. (µm²) |
DMIDNA | 15 |
26.0±5.8 |
9003.5±1785.9 |
20.9±5.0 |
9264.7±2220.7 |
35.1±7.9 |
8748.9±1581.8 |
DMIDA | 8 |
28.7±4.2 |
8917.2±2099.3 |
22.1±2.5 |
9755.1±1120.5 |
41.8±7.0 |
8377.3±3364.8 |
Control | 8 |
17.2±2.9 |
5961.1±1024.1 |
12.9±2.5 |
5714.1±1113.7 |
24.6±3.3 |
6210.0±1005.8 |
Test de ANOVA | 31 |
p<0.001 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.001 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.001 NK: NA-A: NS NA-C:p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.001 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.001 NK: NA-A: p<0.05 NA-C: p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.05 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.05 A-C: p<0.05 |
Tinción Rojo Sirio | N |
% Mesangio |
Área Mesangial (µm²) |
% Flóculo |
Área Flocular (µm²) |
% Flóculo con Relleno |
Área Flocular con Relleno (µm²) |
Área Glomerulo (µm²) |
DMIDNA | 15 |
32.6±26.9 |
3876.2±3283.0 |
59.7±10.9 |
10959.6±2112.6 |
76.9±7.8 |
14249.0±2688.2 |
18772.0±3896.8 |
DMIDA | 8 |
34.7±18.2 |
4951.2±2757.1 |
54.8±8.9 |
13510.8±3102.6 |
73.5±8.4 |
18329.3±4775.9 |
24583.5±5358.5 |
Control | 8 |
12.0±8.0 |
1050.3±734.6 |
48.4±4.0 |
9129.8±1386.8 |
70.4±6.4 |
12579.0±973.3 |
18967.5±3072.1 |
Test de ANOVA | 31 |
NS NK: NA-A: NS NA-C: p<0.05 A-C: NS |
p<0.05 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.05 A-C: p<0.05 |
p<0.05 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.05 A-C: NS |
p<0.01 NK: NA-A: p<0.05 NA-C: NS A-C: p<0.01 |
NS
|
p<0.01 NK: NA-A: p<0.01 NA-C: NS A-C: p<0.01 |
p<0.01 NK: NA-A: p<0.01 NA-C: NS A-C: p<0.05 |
Valores expresados como media ± desviación típica; DMIDNA: DM insulina dependiente normoalbuminúrica; DMIDA: DM insulina dependiente microalbuminúrica; NK: Test de Newman-Keuls; NA: DM normoalbuminúrica; A: DM microalbuminúrica; C: control.
.Tabla 2. Evaluación por análisis de imagen - Tinción inmunohistoquímica para Colágena IV.
Tinción Colágena IV | N |
% Fibrosis Total |
Área Fibrosis Total (µm²) |
% Fibrosis Intersticial |
Área Fibrosis Intersticial (µm²) |
% Fibrosis Periglomer. |
Área Fibrosis Periglomer. (µm²) |
DMIDNA | 15 |
25.5±7.3 |
8992.4±2577.7 |
20.9±5.6 |
9225.8±2470.0 |
33.3±10.2 |
8715.2±2885.7 |
DMIDA | 8 |
27.5±7.6 |
8837.4±2973.9 |
23.4±8.9 |
10353.1±3952.3 |
35.8±8.3 |
7167.8±2273.8 |
Control | 8 |
16.2±1.7 |
5722.6±612.8 |
12.0±1.8 |
5318.5±791.3 |
23.6±3.4 |
6099.4±610.7 |
Test de ANOVA | 31 |
p<0.01 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.01 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.05 A-C: p<0.05 |
p<0.01 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.01 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.01 A-C: p<0.01 |
p<0.05 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.05 A-C: p<0.05 |
p<0.05 NK: NA-A: NS NA-C: p<0.05 A-C: NS |
Tinción Colágena IV | N |
% Mesangio |
Área Mesangial (µm²) |
% Flóculo |
Área Flocular (µm²) |
% Flóculo con Relleno |
Área Flocular con Relleno (µm²) |
Área Glomerulo (µm²) |
DMIDNA | 15 |
24.0±14.0 |
2786.8±2028.2 |
58.9±15.8 |
10453.5±3696.6 |
74.0±15.4 |
13200.2±4152.4 |
17701.3±4202.5 |
DMIDA | 8 |
24.3±14.1 |
3342.2±1608.6 |
56.6±11.9 |
13759.2±3756.6 |
73.0±11.1 |
17772.9±4607.3 |
23863.1±5823.9 |
Control | 8 |
23.0±12.6 |
2043.2±1242.6 |
48.1±10.3 |
8747.3±2420.9 |
68.5±12.5 |
12449.4±3250.3 |
18080.0±2944.6 |
Test de ANOVA | 31 |
NS |
NS |
NS |
p<0.05 NK: NA-A: p<0.05 NA-C: NS A-C: p<0.05 |
NS |
p<0.05 NK: NA-A: p<0.05 NA-C: NS A-C: p<0.05 |
p<0.01 NK: NA-A: p<0.01 NA-C: NS A-C: p<0.05 |
Valores expresados como media ± desviación típica; DMIDNA: DM insulina dependiente normoalbuminúrica; DMIDA: DM insulina dependiente microalbuminúrica; NK: Test de Newman-Keuls; NA: DM normoalbuminúrica; A: DM microalbuminúrica; C: control.