| Comunicación Nº: 092 | English version  |
| Comunicación Nº: 092 | English version |
Antonio Lopez-Beltran, Alberto L. Escudero.
[Título] [Introducción] [Resultados] [Discusión] [Bibliografía] [Comentarios]
 |
|
Evaluación patológica: Fueron seleccionadas treinta y una prostatectomías radicales, fijadas en formol y parafinadas, conteniendo focos de hiperplasia benigna prostática, PIN de bajo grado , PIN de alto grado y adenocarcinoma prostático (grados Gleason 1 y 2).
Las piezas fueron cortadas en cortes de 4 (m y teñidas con hematoxilina-eosina. De cada foco, y por promedio, fueron sistemáticamente escogidos seis campos de visión para la estimación estereológica del volumen nuclear medio. Análisis cuantitativo: Las piezas de próstata fueron cuantitativamente analizadas usando un sistema de análisis de imagen consistente en un microscopio Olympus BH2 conectado a un ordenador personal Ambra a través de una cámara de color Hitachi (modelo VK-C150ED) y un corrector de imágenes Data Translation DT2851 (Figura 1).
Figura 1.- El microscopio permite el movimiento de los cortes en forma escalonada predeterminando los ejes x e y de acuerdo con la extensión de la región de próstata elegida.
Cada imagen microscópica elegida fue almacenada en la memoria del PC (imagen digitalizada) y mejorada usando diferentes algoritmos. El estudio estereológico fue llevado a cabo usando el software Imago, desarrollado por la Universidad de Córdoba, que permite una calibración del sistema y una superposición de varios sistemas tests previamente digitalizados en imágenes microscópicas.
El volumen nuclear medio ((vv nuclear) fue estimado usando el método "point-sampled intercepts" descrito por Gundersen y Jensen (1985)[4-5]. Cada campo microscópico de visión fue superpuesto con un sistema test compuesto por puntos test, espaciados regularmente, asociados con líneas test. Así, en cada contacto de un núcleo con un punto test se mide sus intercepciones siguiendo la dirección de la línea test (Figura 2).
Figura 2.- El volumen nuclear medio fue medido de acuerdo a la siguiente ecuación: (vv nuclear = (((((l3o donde (l3o es la media del cubo de las distancias de intercepción medidas lo .
El método es independiente de la forma del núcleo y los núcleos son muestreados con una probabilidad directamente proporcional al tamaño nuclear ( los núcleos mayores son recalcados más que los menores,) usando puntos al azar en cortes simples. Un requerimiento básico del método es la identificación correcta del contorno individual nuclear, así fueron realizadas mediciones especiales en núcleos irregulares que son cortados dos o más veces en el mismo corte.
En este estudio el numero medio de puntos muestreados interceptados por una región prostática seleccionada fue 117, 138, 148 y 127 de una media de 5, 6, 5 y 6 campos de visión para la hiperplasia benigna prostática, PIN de bajo grado, PIN de alto grado y adenocarcinoma prostático respectivamente.
Análisis estadístico: El (vv nuclear estimado por cada campo de visión, región prostática y grupo de estudio fue calculado usando un programa SAS en un microordenador PC IBM. Así, la media, la desviación estándar, la varianza y el coeficiente de error fueron computados.
La contribución de la varianza total observada en la estimación del(vv nuclear de cada nivel de muestreo ( intercepción nuclear con el campo de visión, campos de visión sin regiones de próstata y regiones prostaticas-p.j. variación biológica entre distintas especies-) fueron obtenidas por el método de análisis interno de la varianza usando el mismo programa SAS.
La comparación del(vv nuclear entre los cuatro grupos investigados fue realizada por ANOVA conjuntamente con el estadístico C de Cochran para homogeneidad de varianzas. El test de Duncan fue realizado para la comparación de dos grupos. La distribución normal fue testada para cada grupo usando el test de Kolmogorov-Smirnov.
El software estadístico SPSS/PC+ (procedimiento Oneway y Test Npar K-S) fue aplicado
|
|
