Comunicación |
Frede Silvia, Hliba Ernesto.
Se estudió un total de 50 materiales, correspondientes a epitelio de genitales femeninos. Todos poseían diagnóstico previo (citológico y/o histopatológico) compatible de infección por VPH. Los mismos se revisaron y reclasificaron con éstas metodologías, incluyendo Microscopía de Alta Resolución.(MOAR)
Los especímenes se obtuvieron mediante raspados de la lesión o por medio de biópsias quirúrgicas dirigidas colposcópicamente.
Los materiales fueron clasificados según la histopatología que presentaban. Así, se estudiaron 25 lesiones de cuello uterino de las cuales 8 correspondían a formaciones acuminadas, 5 condilomatosis vaginales, 12 vulvares y 8 condilomas ubicados en región perianal.
Los diagnósticos citológicos y/o histopatológicos previos fueron: lesiones con atipia coilocítica leve: 32, con atipia coilocítica moderada 11, lesiones con atipia severa 3 . Se diagnosticaron 3 carcinomas de cuello uterino ,correspondiendo sólo 1 caso a carcinoma de vulva.
El material obtenido por raspado se fijó en fijador de Karnovsky enfriado(glutaraldehído-paraformaldehído) a PH 7,2 enfriado, centrifugándoselo a 3000 r.p.m.; se quitó el sobrenadante,volviéndoselo a centrifugar para lograr un sedimento óptimo. Los especímenes de biópsias quirúrgicas,se fijaron en el mismo fijador, iniciándose el procesamiento para electromicroscopía.
Todos los materiales fueron incluídos en Araldita.
Para poder seleccionar áreas para el estudio ultraestructural, se realizaron cortes de aproximadamente una micra de espesor, los cuales se tiñeron con azul de toluidina, meteramina-plata y fucsina básica.
Las secciones ultrafinas fueron montadas en grillas de cobre de 300 mesh y contrastadas con citrato de plomo y acetato de uranilo, siendo observadas en un Microscopio Electrónico Elmiskop 1 a magnificaciones que oscilaron entre los 2000 a 60.000 aumentos.