Comunicación
Nº 028
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Alvarez Garcia, Augusto. Sanchez Blas, Mercedes. Arnal Monreal, Francisco. Gomez Gutierrez, Manuel.
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Caso clínico
Varón de 51 años de edad que fue sometido a doble trasplante hepático y renal en Octubre de 1994. Su fallo hepático fue debido a una cirrosis terminal asociada a HCV y su insuficiencia renal consecuencia de un rechazo crónico a un primer trasplante renal efectuado 7 años antes por padecer una pielonefritis crónica. Tanto donante como receptor presentaban seropositividad para CMV y EBV. El protocolo de inmunosupresion consistió en triple terapia: ciclosporina, azathioprina y prednisona. Una biopsia hepática realizada 20 días post-trasplante sugirió reinfeccion por HCV. A los 36 días post-trasplante la función hepática se estabilizo en niveles normales.
Cuatro meses después del trasplante el paciente presento ictericia. Un TAC visualizaba una masa en hilio hepático que dilataba las vial biliares intrahepáticas. La laparoscopia con biopsia confirmo que se trataba de un linfoma no hodgkin de célula grande B asociado a EBV y que ocupaba el hilio hepático anclándose en la anastomosis de la arteria y vena porta. Un estudio de extensión que incluyo biopsia de MO no pudo demostrar extensión fuera del hilio hepático.
Al paciente se le redujo el Tto inmunosupresor añadiéndosele acyclovir 800 mg/ 4 veces día. Estudios seriados radiologicos mostraban un aumento en el tamaño del tumor, añadiéndosele quimioterapia (adriamicina, vincristina y cyclofosfamida), sin conseguirse tampoco reducción de la masa tumoral. El deterioro de la función hepática hizo considerar como única posibilidad terapéutica un retrasplante, que fue realizado 8 meses después del primer trasplante hepático. El Tto inmunosupresor utilizado fue cyclofosfamida y prednisona. A los tres meses el paciente presento una alteración de los test de función hepática (Bilirrubina total 24mg/dl, Aspartato aminotrasferasa 334UI/L, Gammaglutamil transferasa 277 UI/L). Una biopsia hepática demostraba un episodio de rechazo agudo. Se vario el Tto inmunosupresor con FK-506, normalizándose los test de función hepática. En la actualidad 20 meses después de efectuado el retrasplante el paciente se encuentra estable sin recurrencia de su linfoma.
Histopatologia
El tejido remitido tanto en una biopsia por aguja como el correspondiente a la pieza de trasplantectomia fue fijado en formol tamponado al 10%, se incluyo en parafina, se realizaron secciones a 4 micras y se tiñeron con hematoxilina eosina. Se realizaron estudios de inmunohistoquimica con CD20, CD79a, CD3, UCHL1, CD4, CD5, CD30, CD15, Cam 5.2, CK7, and S-100 (Dako) en material incluido en parafina con técnicas de peroxidasa sistema avidina biotina. Se emplearon controles adecuados tanto positivos como negativos
Estudios moleculares
El ADN del linfoma fue aislado en material incluido en parafina Se usaron dos técnicas diferentes de PCR para la detección de reordenamiento Ig H de acuerdo con el método previamente descrito 1 usando cebadores FR3A/LJH y FR3A/VLJH en uno y FR2A/LJH y FR2A/VLJH en el otro
También con PCR DNA del linfoma, regiones de EBV fueron ampliadas con TIP y REP de acuerdo con el método previamente descrito 7.
Para determinar el origen de las células tumorales DNA se aisló de sangre periférica del receptor, del bloque de parafina del hígado del donante (biopsia tiempo cero), y del linfoma. El ADN fue ampliado con YNZ 22 y MCT 118 cebadores específicos como se describió previamente8 con una mínima modificación. Los productos se amplificaron con electroforesis en gel de agarosa al 4% y se visualizaron con tinción de bromuro de etidio.
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